菌絲成熟後,逐漸由白色變為橙色。此時室內光線要增加到白色,白天利用自然散射光,保持200勒克斯。夜間可用日光燈作光源,每天光照不低於10h,促進菌絲轉色,刺激原基形成。當物料表面鼓包形成小米顆粒原基時,要適當通風,補充新鮮空氣,保護室內溫度18℃-22℃,將相對氣溫提高到80%-85%。濕度過高,容易使培養基過早失水,影響產量。蛹蟲草有很強的趨光性。因此,在子實體形成後,應根據情況適當調整培養瓶與光源或室內光源的相對方向,以保證子實體的正常生長形態,從而提高產量,形成頂部略膨大呈桔黃色或桔黃色的桿狀亞基(子實體)。當子實體不再生長,頂端出現許多小刺時,表明它已經成熟。采收時用無菌鑷子除去子實體,然後加入少許營養液,重新包好瓶口,繼續培養20天左右,即可長出第二批子座。將收獲的子實體風幹或低溫幹燥後出售。非賣品,應密封保存在低溫幹燥處。
液體培養
天然蛹蟲草資源匱乏,人工固體培養周期長,條件不易控制。深層培養法獲得的蟲草菌絲化學成分接近於從自然界采集的蟲草,人們所需的物質可以從發酵液中獲得,也可以大大縮短生產周期。
蟲草菌絲體最適生長溫度為20 ~ 25℃,蛋白腖是菌絲體發酵的最佳碳源,碳氮比為1∶2或1∶3為宜。
發酵的最佳培養基組成為:5%米粉、1.5%豆餅粉、1.5%麥芽粉、0.1%KH2PO4、0.05% mgso 4·7H2O。
影響蛹蟲草胞外多糖產量的各實驗因素的顯著性順序為:甜菜糖>:;酵母抽提物粉>:KNO3 & gtMgSO4 7H2O & gtFeSO4 & gt磷酸二氫鉀.胞外多糖的最佳發酵參數為:初始pH值500ml,三角瓶裝液量65438+500ml,接種量6%,溫度28℃,周期96h。
培養基配方為:玉米粉4%,大豆粉0.6%,酵母粉0.3%,K2HPO40.05%,MgSO40.05%,接種量3%,pH5.5,認為碳源因素對胞外多糖的產生有顯著影響。
蛹蟲草發酵適宜的培養基組成為:蔗糖5.0%,玉米漿3.0%,酵母膏0.5%,硫酸鎂0.05%,磷酸二氫鉀40.05%。認為蔗糖為最佳碳源,酵母膏為氮源,細胞產量最高。
蛹蟲草菌絲體生長可利用多種碳氮源,以紅糖碳源和奶粉為氮源的液體培養基最佳,適宜的碳源與氮源比例為2.0~2.5/1.0,適宜的PH為5.0~6.5。
培養基的組成確定為蛋白腖1.5%,硫酸鎂40.05%,磷酸二氫鉀40.1.05%,維生素b 1.5毫克/升,2.4d 2毫克/升..在相同條件下,優化培養基的發酵產量比原始培養基提高了4.5%。初步獲得了蛹蟲草液體培養條件和生長動力學,為工業化生產提供了壹定的理論依據。
培養基配比可使菌株蟲草素含量提高到1.21%,比Czapek培養基提高了8.1倍。柴建平等人得出玉米粉是最佳碳源,蠶蛹粉是最佳氮源,硫酸鎂是最佳無機鹽。液體發酵的最佳培養基配方為玉米粉(20g/1000ml)、蠶蛹粉(5g/1000ml)、硫酸鎂(0.5g/1000ml)。