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瓊脂糖凝膠電泳是怎麽跑成這樣的?

根據我多年的經驗,小夥子,妳亮的橡膠背景說明妳的UV太亮了,平時不需要這麽強光就能看到條紋。

從妳膠水的樣子就能看出來,妳跑的時間太長了。妳好像用的是SYBR green。當妳跑得太久時,這種染料會向紙條的相反方向移動,導致妳的膠水下部看不到標記和背景光。以及長時間跑膠導致的溫度升高(手裏溫熱柔軟,聽起來像便便。。。),以至於膠水中的大量樣品和染料散開,導致妳的制作者和膠帶不夠亮。

從妳馬克筆的位置可以看出妳已經跑膠很久了,因為最大的壹條位置比較低。

即使妳的背景如此強大,妳也可以看到妳的樣品孔底部附近有壹個條帶。我不知道妳樣本的大小和來源,但我可以給出以下可能的原因:

您的裝載緩沖區不正確,導致樣本條異常移動。

最有可能的原因是妳樣本裏的DNA那麽大。如果妳是提取質粒,妳做錯了,提取了細菌的核DNA,所以才這麽大。妳做錯的可能是裂解步驟,用了5分多鐘,或者妳把裂解液和細菌劇烈混合了,所以只有invert能做到。

妳還要保證樣本量,測濃度,壹般200ng的條很亮。

跑膠時電壓壹般為80-120,可以低也可以高達200,但室溫下建議80-100。持續時間20-60分鐘,壹般建議30分鐘,但可以跑壹會兒,拿出來曬曬紫外線。這時,妳可以看到條紋。如果妳不能把他們分開,就把他們放回去,跑壹會兒。如果真的需要長時間跑步,4度跑。