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瓊脂糖凝膠電泳原理

不同大小的DNA片段在堿性條件下帶負電,在電流的作用下從負極向正極移動。根據不同DNA分子片段的大小和形狀,它們在電場中的遊動速度不同,所以在相同的時間下,紫外線照射後可以看到DNA的位置,從而達到分離鑒定的目的。

瓊脂糖凝膠電泳步驟:1。用蒸餾水清洗制膠工具,準備制膠板,用瓊脂封住模具邊緣,設置梳子;2.根據待分離樣品(DNA)的大小,配制適當濃度的瓊脂糖凝膠。準確稱取壹定量的瓊脂糖幹粉,加入到適當體積的錐形瓶中,加入壹定量的電泳緩沖液(約30ml TAE);放入微波爐加熱融化,放涼壹會兒(不要燙手就好)。

3.將融化的瓊脂溶液搖勻,倒入電泳槽中,等待凝固;4.室溫固化約30-40min,小心拔出梳子,取出固化的凝膠放入電泳槽,準備上樣;5.將電泳緩沖液(TAE)倒入電泳槽中;通過約1mm的膠面後,去除膠孔內的氣泡。

6.上樣:在5ulDNA樣品中加入1ul上樣緩沖液和1ul染料,用抓具混勻後加入凝膠孔中;7.上樣完成後,打開電源,紅色陽極和黑色陰極,DNA樣品從陰極移動到陽極,上樣口側電壓為負40-50v,電壓約30 min(