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電泳時上樣緩沖液與樣品DNA的比例是多少?

電泳時上樣緩沖液與樣品DNA的比例為5: 1。

即在5份DNA溶液中加入1份6×Loading染料。例如,在10ul DNA梯中加入2ul 6×加載染料。

6×上樣染料的上樣溶液含有10mM Tris-HCl(PH8.0)、1mM EDTA、2.5%溴酚藍和4%蔗糖。

推薦凝膠濃度或上樣量:2.0 ~ 2.5%瓊脂糖凝膠(溴乙烷終濃度:0.5 ug/ml);5 ~ 10ul/膠孔。

在儲存或使用DNA標記期間,應避免重復冷凍和解凍;在長期凍存過程中,可能會形成DNA濃度梯度,因此解凍後應搖勻,短暫離心。

擴展數據

1和加載緩沖器的功能:

(1)中的指標是溴酚藍和二甲苯藍,顯示電泳的進度,以便我們及時停止電泳。

(2)裏面的成分甘油可以增加樣品密度,使樣品密度大於TAE,從而沈降到樣品孔中,防止樣品從樣品孔中飄出。

2.壹些緩沖液中加入了SDS,這是通常所說。SDS主要促進聚合酶的變性,因為未完成的聚合酶會與DNA雙鏈結合,影響其遷移速率。細胞裂解後的裂解液在65438±000℃的負荷下加熱,以終止酶促反應,防止提取的蛋白質降解。

百度百科-加載緩沖區

百度百科-100bp DNA階梯