方法名稱:
鹽酸金黴素的測定—高效液相色譜法
應用範圍:
本方法采用高效液相色譜法測定鹽酸金黴素(C22H23ClN2O8 ·HCl)的含量。
本方法適用於鹽酸金黴素。
方法原理:
供試品制成0.01mol/L鹽酸溶液,進入高效液相色譜儀進行色譜分離,用紫外吸收檢測器,於波長370nm處檢測鹽酸金黴素吸收值,計算出其含量。
試劑:
1. 0.1mol/L草酸銨溶液
2. 二甲基甲酰胺
3. 0.2mol/L磷酸二氫銨溶液
4. 氨試液
5. 0.01mol/L鹽酸溶液
儀器設備:
1. 儀器
1.1 高效液相色譜儀
1.2 色譜柱
十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑(pH值適應範圍應大於8.0)差向金黴素與四環素、四環素與金黴素間的分離度應符合規定。
1.3 紫外吸收檢測器
2. 色譜條件
2.1 流動相:0.1mol/L草酸銨溶液 二甲基甲酰胺 0.2mol/L磷酸二氫銨溶液=68 27 5,用氨試液調節pH值至8.3。
2.2 檢測波長:370nm
2.3 柱溫:35℃
試樣制備:
1. 稱取供試品
精密稱取本品25mg,置50mL量瓶中。
2. 對照品溶液的制備
精密稱取25mg,加0.01mol/L鹽酸溶液溶解並制成每1mL含0.5mg的溶液,搖勻,即得。
3. 供試品溶液的制備
將供試品加0.01mol/L鹽酸溶液溶解並稀釋至刻度,搖勻,即得。
註:“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之壹。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
操作步驟:
分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各20μL 註入高效液相色譜儀,用紫外吸收檢測器,於波長370nm處測定金黴素的吸收值,計算出其含量。
參考文獻:
中華人民***和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業出版社,2005年版,二部,p.539。