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1%瓊脂糖凝膠電泳怎麽做?

1.1%瓊脂糖凝膠的制備(大膠70ml,小膠50ml):稱取0.7 g(0.5 g)瓊脂糖於錐形瓶中,加入70ml(50m l)1×tae,將瓶口倒置,微波爐加熱煮沸3次,直至瓊脂糖完全熔化。

2.膠片準備:將電泳槽中的有機玻璃內槽(制膠槽)清洗幹凈,晾幹,放入制膠玻璃板中。拿透明膠帶把玻璃板和內膽兩端的邊緣封起來,形成壹個模具。將內槽置於水平位置,並將梳子置於固定位置。將冷卻到65℃左右的瓊脂糖凝膠溶液混合,小心地倒入內罐中的玻璃板中,使膠液慢慢鋪開,直至在整個玻璃板表面形成均勻的粘合層。

3.室溫靜置至凝膠完全固化,輕輕垂直拉動梳子,取下膠帶,將凝膠和內槽放入電泳槽中。加入1×TAE電泳緩沖液,直至不通過橡膠板。

擴展數據:

儲存溫度:常溫

商品名很多,比如Sepharose(瑞典,pharmacia),Bio-Gel-A(美國Bio-Rad)等等。瓊脂糖凝膠依靠糖鏈之間的次級鏈,如氫鍵,來維持網絡結構,網絡結構的密度取決於瓊脂糖的濃度。壹般來說,它的結構是穩定的,並且它可以在許多條件下使用(例如水、pH4-9範圍內的鹽溶液)。

瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,不能用高壓滅菌,可以用化學滅菌法處理。

瓊脂糖,縮寫為Ag,是瓊脂中不帶電荷的中性成分,也譯為瓊脂或瓊脂糖。瓊脂糖的化學結構由β-D-吡喃半乳糖(1-4)和3,6-脫水的α-L-吡喃半乳糖單元連接而成。

將瓊脂糖,即主要成分為多糖的瓊脂,幾乎不含硫酸根,溶於熱水中,冷卻制成凝膠。制備的小顆粒用於凝膠過濾。適用於葡聚糖凝膠不能分級分離的大分子、細胞顆粒、病毒等的凝膠過濾。如果使用濃度低於5%的凝膠,也可以分餾。

由於其低吸附性,它有時被用來代替瓊脂作為免疫電泳或凝膠內沈澱反應的支持物。

參考資料:

百度百科-瓊脂糖凝膠