壹、大腸菌群的檢測GB4789.3-2010
第壹種方法為大腸菌群MPN計數法,第二種方法為大腸菌群平板計數法
1.1十二烷基硫酸鹽胰蛋白腖(LST)肉湯:將35.6g溶於1000ml蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝於倒置發酵管的試管中,每管10ml,121℃,65448高壓滅菌。除蒸餾水外的雙份配料。
1.2亮綠乳糖膽鹽(BGLB)肉湯:稱取30g,溶於1000ml蒸餾水中,分裝,115℃滅菌備用。
1.3無菌生理鹽水:稱取8.5gNaCl,溶於1L蒸餾水中。裝於250ml錐形瓶中,0℃高壓滅菌1215分鐘備用。
1.4結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA):稱取41.6g,溶於1L蒸餾水中,搖勻,加熱煮沸2min,冷卻至50℃,倒入平板中。
無菌1 mol/L NaOH:將40 g NaOH溶於1 000 mL蒸餾水中,0℃高壓滅菌1215 min。
無菌1 mol/L HCl:取90 mL濃鹽酸,用蒸餾水稀釋至1 000 mL,0℃高壓滅菌15 min。
二、大腸菌群的檢測GB4789.3-2003第壹法大腸菌群MPN計數法
2.1稱取35.0g乳糖膽鹽發酵培養基,溶於1000ml蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝於倒置發酵管的試管中,每管10ml,115℃高壓滅菌備用。除蒸餾水外的雙份配料。
2.2伊紅亞甲藍瓊脂平板:稱取伊紅亞甲藍瓊脂37.5g,溶於1000ml蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝,115℃高壓滅菌,備用。
2.3乳糖發酵管:稱取35.0g乳糖發酵培養基,溶於1000ml蒸餾水中,加熱煮沸至完全溶解,分裝於倒置發酵管的試管中,每管10ml,115℃,高壓滅菌15min。
2.4無菌生理鹽水:稱取8.5gNaCl,溶於1L蒸餾水中。裝於250ml錐形瓶中,0℃高壓滅菌1215分鐘備用。
2.5革蘭氏染色符合GB/T4789-2003中的2。