概論、流行病學、疾病、球菌檢查、感染預防、感染治療、是否存在* * *、傳播途徑、培養方式、檢測方法、材料和方法、實驗步驟、結果和分析。金黃色葡萄球菌簡介又名“金黃色葡萄球菌”，其細胞壁含有90%的肽聚糖和10%的磷酸胞壁酸。肽聚糖的網狀結構比革蘭氏陰性菌更致密，結晶紫在染色時附著不會被酒精脫色。反之，陰性菌細胞壁上的肽聚糖層較薄，交聯程度差，脂質含量高，所以用酒精洗去紫色復合物，再附著沙黃紅。金黃色葡萄球菌與青黴素的發現密切相關。弗萊明發現壹些球菌在他的金黃色葡萄球菌培養皿中被殺死了，於是他發現了青黴素。研究還表明，青黴素僅對以金黃色葡萄球菌為代表的革蘭氏陽性菌有明顯作用。這也是由肽聚糖層的厚度和結構造成的。被稱為超級細菌的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌的顯微圖像可以抵抗幾乎所有的人類藥物，但萬古黴素可以對付它。典型的金黃色葡萄球菌呈球形，直徑約0.8μm，在顯微鏡下呈葡萄串狀排列。金黃色葡萄球菌沒有孢子和鞭毛，大部分沒有莢膜，革蘭氏染色陽性。金黃色葡萄球菌對營養要求低，在普通培養基上生長良好，好氧或兼性厭氧，最適生長溫度37℃，最適生長pH7.4，在幹燥環境下可存活數周。平板上菌落厚，有光澤，圓形，直徑0.5 ~ 1.0 mm，血平板菌落周圍形成透明溶血環。金黃色葡萄球菌具有較高的耐鹽性，能在10~15%NaCl肉湯中生長。能分解葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖，產酸不產氣。甲基紅反應陽性，VP反應弱陽性。許多菌株能分解精氨酸、水解尿素、還原硝酸鹽和液化明膠。金黃色葡萄球菌耐藥性強，對磺胺類、青黴素、紅黴素、土黴素、新黴素等抗生素敏感，但由於這些菌株產生青黴素酶等，容易產生耐藥性。對堿性染料敏感，1/10萬龍膽紫溶液可抑制生長。金黃色葡萄球菌文化在普通培養基中的特點流行病學金黃色葡萄球菌在自然界中無處不在，可存在於空氣、水、灰塵及人畜排泄物中。所以食物被汙染的機會很多。美國疾病控制中心報告說，金黃色葡萄球菌引起的感染是第二位的，僅次於大腸桿菌。金黃色葡萄球菌腸毒素是壹個世界性的健康問題。金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒占美國細菌性食物中毒總數的33%，在加拿大則更多，占45%。金黃色葡萄球菌引起的食物中毒事件在中國也時有發生。如2006年4月5438+0，12日，無錫市錫山區所轄小學、幼兒園因上課期間飲用袋裝奶飲料發生食物中毒事件。金黃色葡萄球菌的流行病學壹般有以下特點:季節性分布，多在春夏季；中毒的食物有很多種，如奶、肉、蛋、魚及其制品。此外，剩菜、煎蛋、糯米糕、涼粉引起的中毒事件也時有報道。上呼吸道感染患者的鼻腔帶菌率為83%，因此人和動物的化膿性感染部位往往成為汙染源。金黃色葡萄球菌是人類化膿性感染中最常見的病原體，可引起局部化膿性感染、肺炎、偽膜性腸炎、心包炎甚至敗血癥、敗血癥等全身性感染。金黃色葡萄球菌的致病性主要取決於其產生的毒素和侵襲性酶:a .溶血毒素:外毒素，可損傷血小板，破壞溶酶體，引起機體缺血壞死。b .殺死白細胞:能破壞人體白細胞和巨噬細胞。c .血漿凝固酶:當金黃色葡萄球菌侵入人體時，會使血液或血漿中的纖維蛋白沈積在細菌或。葡萄球菌引起的感染容易定位，與這種酶有關。d .脫氧核糖核酸酶:金黃色葡萄球菌生產的脫氧核糖核酸酶耐高溫，可作為鑒別金黃色葡萄球菌的依據。E .腸毒素:金黃色葡萄球菌能產生幾種引起急性胃腸炎的蛋白腸毒素，分為A、B、C1、C2、C3、D、E、f八個血清型，腸毒素能耐受100℃煮沸30分鐘而不被破壞。它食物中毒的癥狀是嘔吐和腹瀉。此外，金黃色葡萄球菌還生產表皮素、明膠酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。f .表皮剝脫毒素:引起燙傷樣皮膚綜合征，又稱剝脫性皮炎。g .中毒性休克綜合征毒素(tsst-1)引起的癥狀金黃色葡萄球菌腸炎由金黃色葡萄球菌引起，多為原發病長期使用抗生素導致腸道菌群失調所致。抗生素敏感菌株被抑制，耐藥金黃色葡萄球菌菌株趁機繁殖。金黃色葡萄球菌是壹種侵入性細菌，能夠產生毒素，對腸道具有破壞性。因此，金黃色葡萄球菌腸炎起病急，中毒癥狀嚴重，主要表現為嘔吐、發熱和腹瀉。嘔吐往往發生在發熱之前，發熱很高。輕度大便次數略多，為黃綠色糊狀大便；大便次數嚴重頻繁，壹天可達數十次。大便呈深綠色，水樣，看起來像海水，所以叫海水樣大便。粘液很多，有魚腥味。有時可排出片狀偽膜。假膜放入生理水中，脫落的腸黏膜漂浮在水面上，對診斷很有幫助。小兒體液丟失、脫水、電解質紊亂、酸中毒嚴重，可出現休克。選取大便塗片粘液部分，顯微鏡下可見大量膿細胞。如革蘭氏染色後，顯微鏡下可見大量革蘭氏陽性球菌。當金黃色葡萄球菌在糞便培養中生長時，可以確診。壹、金黃色葡萄球菌檢驗樣品處理:無菌取25g或25mL食品樣品，放入225mL滅菌生理鹽水中，勻漿制成10-1稀釋液。富集培養:將10-1稀釋液接種到7.5%NaCl肉湯或胰蛋白腖肉湯中，37℃培養24小時。分離培養:分別用上述稀釋液或培養液劃線血平板和Baird-Parker平板，37℃培養24-48小時。金黃色葡萄球菌在血平板上呈金黃色或白色菌落，大而凸，表面光滑，周圍有溶血圈。在Baird-Parker平板上，菌落呈圓形，直徑2 ~ 3毫米，顏色為灰色或黑色，周圍有渾濁帶。染色觀察:從平板上挑取可疑菌落進行革蘭氏染色，金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽性。顯微鏡下呈葡萄狀排列，無孢子和莢膜，直徑0.5 ~ 65438±0 μm，血漿凝固酶試驗:吸取0.5mL兔血漿和0.5mL金黃色葡萄球菌試液浸沒肉湯24小時，充分混合，置於36° 65438±0°C，每半小時觀察6小時，出現凝固，即小試管傾斜或倒置時，內容物不流動，判定為陽性。同時做壹個陰陽對比。耐熱核酸酶試驗:將肉湯培養物在沸水浴中65438±05min處理24小時，將種子刺在有接種環的甲苯胺藍-DNA平板上，在36±65438±0℃培養24小時。刺線周圍有淡粉色的是陽性。金黃色葡萄球菌在這次測試中呈陽性。其次，金黃色葡萄球菌腸毒素的檢測主要有動物試驗、血清學試驗、免疫熒光試驗和酶聯免疫吸附試驗，這裏就不贅述了。預防感染首先，防止食品被金黃色葡萄球菌汙染，防止食品被帶菌人員汙染:對生產加工人員，患有局部化膿性感染(如疥瘡、手指化膿等)者，應定期進行健康檢查。)和上呼吸道感染(如鼻竇炎、化膿性肺炎和口腔疾病等。)應暫時停止工作或調換崗位。在肉類加工廠，受局部化膿感染的家禽和牲畜屍體的患病部分應切除，並通過高溫或其他適當方式處理。其次，防止葡萄球菌腸毒素的形成，食物應低溫保存，通風良好，防止腸毒素的形成；在氣溫較高的春夏季節，食物在陰涼通風處存放時間不宜超過6小時，食用前應徹底加熱。第三，金黃色葡萄球菌耐熱、耐幹燥能力比壹般無芽孢菌強，80℃加熱30分鐘才能殺滅。在表面覆蓋壹層0.1mg/cm3的超細二氧化鈦，在光照下能快速有效地殺滅細菌。在幹燥的膿液和痰液中可存活2 ~ 3個月。在10 ~ 15分鐘內死於5%石炭酸。對堿性染料敏感，龍膽紫溶液的生長可被1/100000抑制。由於MRSA(耐甲氧西林金黃色葡萄球菌)，青黴素壹般不用於感染治療。因此，金黃色葡萄球菌病毒感染者可用紅黴素、青黴素、慶大黴素、萬古黴素或頭孢菌素VI治療。治療事項1，毛囊炎治療要註意飲食，不吃辛辣食物，不能喝酒。2.不要用手抓患處，以防繼發感染。3.癥狀完全消失後，鞏固1個療程。* * *有衛生部10月24日公布的食品安全國家標準《速凍面米制品》(GB 19295-2011)。在幾個速凍品牌食品因為檢出金黃色葡萄球菌而下架的背景下，新國標因為具備了允許金黃色葡萄球菌存在的條件而引來諸多討論。衛生部專家表示，新國標更加科學合理，並沒有降低要求。本新國標是衛生部根據《食品安全法》及其實施條例，在執行原《小麥粉、大米制成的速凍及預包裝食品衛生標準》(GB 19295-2003)的基礎上制定的，將於2011+21正式實施。傳播途徑壹般來說，金黃色葡萄球菌可通過以下途徑汙染食品:食品加工者、廚師或銷售人員攜帶細菌，造成食品汙染；食品本身在加工前帶菌，或加工過程中被汙染，產生腸毒素，引起食物中毒；熟食產品包裝不嚴，運輸過程汙染；奶牛患化膿性乳腺炎或家畜局部化膿時對身體其他部位的汙染。甘露醇高鹽瓊脂可用於金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養，蛋白腖和牛肉粉可提供氮源、維生素和生長因子。d-甘露醇是壹種可發酵的糖；氯化鈉維持平衡的滲透壓；瓊脂是培養基的凝固劑；酚紅用作pH值指示劑。測試方法材料和方法1，材料
①培養基:7.5%NaCl肉湯培養基和血瓊脂平板培養基(按常規方法配制)。
②試劑:7.5%NaCl肉湯培養基，革蘭氏染色，血瓊脂平板，Baird-Parker瓊脂平板，生理鹽水，兔血漿(1: 4)。
③設備:培養箱、顯微鏡、天平、均質機、載玻片、L型塗片棒、三角瓶、刻度移液管、平板、試管和試管架、研磨、1ml註射器、
④實驗動物:健康小鼠。
2.方法
待測樣品25g+225ml無菌生理鹽水。
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直接計數富集培養方法
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貝爾德-帕克瓊脂平板7.5%氯化鈉肉湯培養基
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血液板。血液板
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塗片染色顯微鏡觀察溶血現象動物接種試驗血漿凝固試驗
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報告實驗步驟1，樣品收集
稱取25g火腿腸，切碎攪拌均勻(用滅菌研缽研磨)，置於250ml錐形瓶中，加入225ml滅菌生理鹽水制成1: 10的樣品懸液，混勻作用20min，然後隨機取10ml離心。
2、富集分離和培養
①增菌培養法:吸取5ml上清液，接種於7.5%NaCl肉湯培養基中，置於(37±65438±0℃)恒溫箱中24h，劃線接種於血平板中，於(37±65438±0℃)恒溫箱中孵育24h。
②直接計數法:吸取上述懸液，稀釋65，438+00倍。根據樣品的汙染情況，選擇65，438+0 ml不同濃度的稀釋液，分別加入三個Baird-Parker瓊脂平板，每個平板的接種量分別為0.3ml、0.3ml、0.4ml。用滅菌的L形包被棒包被整個平板，在恒溫箱(3765438±0℃)中培養24h。之後，分別計數生長在三個周圍有渾濁帶的平板上的黑色菌落。轉移至血平板，在(37 65438±0℃)恒溫箱中培養24小時。
3.塗片、染色和顯微鏡檢查
未知細菌的純培養物塗片，革蘭氏染色，顯微鏡觀察。
4.生化實驗
①酶接觸試驗
將1滴3%雙氧水滴在載玻片上，取純化後的細菌放入雙氧水中觀察變化。30秒內產生大量氣泡者為陽性，不產生氣泡者為陰性。
②血漿凝固酶試驗
吸取1: 4的新鮮兔血漿0.5ml，置於小試管中，加入已培養24小時的2①的肉湯培養液0.5ml，搖勻，置於(37 1℃)培養箱中，每隔0.5h觀察壹次，觀察6h，看有無凝固。試管傾斜或倒置時，出現凝塊，即可判定為陽性，以已知的陽性葡萄球菌和陰性肉湯作為對照。
5.動物感染實驗
將2①中血瓊脂平板上純化的菌落用無菌生理鹽水洗滌後，0.5ml/只小鼠腹腔註射，其他小鼠註射無菌生理鹽水作為對照。在相同的條件下觀察癥狀。解剖感染試驗中出現癥狀或死亡的小鼠，收集並分離病料。結果與分析1，培養特征和形態特征
①文化特征
在37℃條件下，需氧和厭氧培養的血液營養瓊脂平板上生長出光滑、濕潤、鼓脹的金黃色菌落，大小約為65438±0mm，並有β溶血現象。
②顯微鏡檢查結果
顯微鏡下，細菌為革蘭氏陽性球菌，呈葡萄串狀排列，有的2、3個球菌相連。根據菌落形態和鏡檢結果，懷疑該菌株為葡萄球菌。
2、菌落計數報告
將直接計數試驗中三個平板中疑似金黃色葡萄球菌的金黃色葡萄球菌菌落數相加，乘以血漿凝固酶試驗陽性數，除以5，再乘以稀釋倍數，得到每克樣品中金黃色葡萄球菌的數量。
3.動物感染試驗
註射生理鹽水的小鼠沒有變化:接種分離細菌的小鼠在9小時內死亡。對死亡小鼠進行解剖，收集病料，進行細菌分離和生化試驗，獲得原始分離菌。“金黃色葡萄球菌”被列為“非常重要的優質工程”。金黃色葡萄球菌的標準因失蹤、三泉、灣仔碼頭事件而備受爭議。在2011，12，1實施的速凍食品新國標中，金黃色葡萄球菌由“不得檢出”改為“* * *”，但根據市質監局征求意見後公布的抽檢項目，仍擬將金黃色葡萄球菌列為A類檢驗項目，並標註為速凍米粉食品的“非常重要質量項目”，包括速凍水餃、水餃、包子、花卷、饅頭產品中“金黃色葡萄球菌”檢出嚴重不合格。據市質監局介紹，在速凍面制品的抽檢中，金黃色葡萄球菌也是A類檢驗項目。食品檢驗項目中有壹項或多項不符合規定要求的，判定為不合格；當產品有A類不合格項目時，為嚴重不合格；只有B類項目不合格，壹般不合格。同時，三聚氰胺和蘇丹紅在嬰幼兒奶粉和蛋制品中也是同壹個A類。為了避免壹些肉類和家禽食品中可能含有鹽酸克倫特羅，還有壹個專門的肉類和家禽罐頭食品中鹽酸克倫特羅的檢測。速凍食品“金黃色葡萄球菌”可檢出* * *我國現行的《以小麥粉和大米為主要原料的速凍和預包裝食品衛生標準》(GB 19295-2003)規定不得檢出金黃色葡萄球菌等致病菌。但衛生部2012年2月21日實施的《速凍面米制品食品安全國家標準》將金黃色葡萄球菌的檢測由定性改為定量，規定每批產品中只有1樣品才能檢出含量為1000至65438+的金黃色葡萄球菌。