澱粉酶測定方法

植物中的澱粉酶能將貯藏的澱粉水解成麥芽糖。澱粉酶幾乎存在於所有植物中，其中以禾谷類種子的澱粉酶活性最強。植物中有α–澱粉酶和β–澱粉酶，其活性因植物的生長發育時期不同而有所變化。通過本實驗掌握澱粉酶的提取和測定方法。

原理：

α–澱粉酶和β–澱粉酶，各有其壹定的特性，如β–澱粉酶不耐熱，在高溫下易鈍化，而α–澱粉酶不耐酸，在pH3.6以下則發生鈍化。通常提取液中同時有兩種澱粉酶存在，測定時，可根據它們的特性分別加以處理，鈍化其中之壹，即可測出另壹酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15 min以鈍化β–澱粉酶，便可測定α–澱粉酶的活性。或者將提取液用pH3.6之醋酸在0℃加以處理，鈍化α–澱粉酶，以求出β–澱粉酶的活性。

澱粉酶水解澱粉生成的麥芽糖，可用3，5–二硝基水楊酸試劑測定。由於麥芽糖能將後者還原生成3–氨基–5–硝基水楊酸的顯色基團，在壹定範圍內其顏色的深淺與糖的濃度成正比，故可求出麥芽糖的含量。以單位重量樣品在壹定時間內生成的麥芽糖的量表示酶活力。