(甲基百裏酚藍比色法)
壹.原則
血清中的鈣離子在堿性溶液中與甲基百裏酚藍(MTB)結合形成藍色絡合物。鈣的含量可以通過比色方法與相同的鈣標準進行比較來計算。
二、試劑組成及制備:
1,試劑1: MTB試劑:40ml×1瓶,
儲存在4℃的暗處。
2.試劑二:堿性溶液:100ml×1瓶。
3.試劑三:蛋白澄清劑:5ml×1瓶,遇冷會凝固,水浴加熱至透明後方可使用。
4.2.5 mmol/L鈣標準溶液:lml×2片,4℃避光保存。
三、操作步驟
空白管
標準管
量筒
試劑1: MTB試劑(毫升)
1.0
1.0
1.0
試劑2:堿性溶液(毫升)
2.0
2.0
2.0
去離子水
10
u
l
2.5毫摩爾/升鈣標準溶液
10u
l
血清10u
l
混勻,靜置5分鐘,波長610mn,光程1cm,蒸餾水調至零,測量各管吸光度。
四、計算:
1,計算公式:
血清鈣含量
(毫摩爾/升)=(壹次測定
–
壹片空白)
/
(壹個標準
–
空白)×2.5