取壹個96孔酶標板,根據下表添加試劑。TubeNo1 2 3 4 5 6 7 8標準蛋白質溶液(μl)蒸餾水(μl)
BCA試劑(微升)
蛋白質濃度(毫克/毫升)0
20
200
0 1
19
200
0.025 2
18
200
0.05 4
16
200
0.1 8
12
200
0.2 12
八
200
0.3 16
四
200
0.4 20
200
0.5加入上述試劑後,準確吸取20μl樣品溶液於酶標孔中,加入200μl BCA試劑,輕輕搖勻,在37℃保溫30-60min,冷卻至室溫,與空白對照比較顏色,在酶標儀上於590nm處繪制標準曲線,以牛血清白蛋白含量為橫坐標,吸光度為縱坐標。以標準曲線的空白為對照,根據樣品的吸收值從標準曲線中查出樣品的蛋白質含量。