凝膠色譜原理

凝膠色譜的原理是凝膠色譜的固定相是多孔凝膠物質，流動相是水溶液或有機溶劑，根據不同分子體積的大小進行分離。小分子可以擴散到凝膠縫隙中並從中穿過，出峰最慢；中等分子只能通過部分凝膠間隙，中速通過，大分子被排除在外，最快見峰；溶劑分子小，所以在末端有峰，死體積前都有峰；相對分子質量在100到105之間的化合物可以進行質量分離。

凝膠色譜又稱分子排阻色譜，是基於分子篩的原理，多用於分離有機大分子，如蛋白質、多肽、多糖等。對高分子物質有很高的分離效果。大分子由於直徑較大，不易進入凝膠顆粒的微孔，只能分布在顆粒之間，所以洗脫時向下運動速度較快。

小分子物質不僅可以在凝膠顆粒之間的空隙中擴散，還可以進入凝膠顆粒的微孔，即進入凝膠相。在向下運動的過程中，它們從壹個凝膠擴散到顆粒之間的空隙，然後進入另壹個凝膠顆粒。於是它們繼續進入並擴散，小分子物質的向下運動速度滯後於大分子物質，使樣品中的大分子先流出色譜柱，中等分子後流出，最小分子最後流出。

分子篩效應:當含有各種分子的樣品溶液緩慢流過凝膠柱時，每個分子同時以兩種不同的方式運動，即垂直向下運動和無定向擴散運動。大分子由於直徑較大，不容易進入凝膠顆粒的微孔，只能分布在顆粒之間，所以洗脫時下移較快。

小分子物質不僅可以在凝膠顆粒之間的空隙中擴散，還可以進入凝膠顆粒的微孔，即進入凝膠相。在向下運動的過程中，它們從壹個凝膠擴散到顆粒之間的空隙，然後進入另壹個凝膠顆粒。於是它們繼續進入並擴散，小分子物質的向下運動速度滯後於大分子物質，使樣品中的大分子先流出色譜柱，中等分子後流出，最小分子最後流出。這種現象被稱為分子篩效應。