蘆丁是黃酮醇化合物槲皮素的蕓香糖苷
糖苷是糖類半縮醛結構再和另壹分子的羥基化合物形成縮醛形成的化合物,縮醛結構在酸性水溶液中會發生水解。
蘆丁水解,糖苷鍵斷裂,生成槲皮素
1、 稱取3g槐花米於研缽中研成粉狀,置於50mL燒杯中,加入30mL飽和石灰水溶液,加熱至沸,並不斷攪拌,煮沸壹刻鐘後,抽濾,濾渣再用20mL飽和石灰水溶液煮沸10min,合並濾液用15%鹽酸中和,調節PH=3-4,放置1-2小時,使沈澱,抽濾,水洗,得蘆丁粗產物。 2、 將制得的蘆丁粗品置於50ml燒杯中,加入30ml水,加熱至沸,並不斷攪拌,並慢慢加
入10mL飽和石灰水溶液,調節PH=8-9,等沈澱溶解後,趁熱過濾,濾液置於50mL燒杯中,用15%鹽酸調PH=4-5,靜置30min,蘆丁以淺黃色結晶析出,抽濾,水洗,烘幹得蘆丁純品。
實驗壹、槐米中蘆丁的提取、精制和鑒定
(壹)實驗目的要求
1. 制備蘆丁,供藥用。
2. 通過蘆丁的制備,掌握黃酮類化合物的提取分離的原理和操作。
3. 熟悉重結晶技巧。
4. 了解和掌握黃酮類化合物的壹些主要性質和鑒定方法。
(二)實驗的基本原理
1. 蘆丁的提取原理
利用蘆丁結構中含有多個酚羥基,呈酚酸性,能在堿水中溶解的性質,可用堿性溶劑進行提取,提取液加酸後可沈澱析出(堿溶酸沈法)。也可利用蘆丁在冷水中溶解度小,在熱水中溶解度大的性質進行提取。
2. 蘆丁的分離原理
利用蘆丁結構在冷乙醇中溶解度小,在熱乙醇中溶解度大,以及在熱水中溶解度大,在冷水中溶解度小的性質分離。蘆丁用溶劑加熱溶解後,趁熱抽濾,濾液放冷後能析出而達到分離的目的(如不純可再重復操作進行分離)。也可采用醇溶水沈法進行精制。
3. 蘆丁的鑒定原理
(1)利用吸附薄層色譜的分離原理,蘆丁與蘆丁對照品在同壹條件下進行展開,顯色,以達到鑒定蘆丁的目的。
(2)通過專屬的化學顯色反應(如三氯化鋁顯色反應),確定蘆丁的成分類型(黃酮類)。
(三) 實驗內容
1. 用堿提法、水提法、醇提法提取槐米中蘆丁。
2. 用酸沈法和冷卻過飽和法分離蘆丁。
3. 溶劑重結晶精制蘆丁。
4. 薄層色譜法和顯色反應鑒定蘆丁
(四) 實驗藥材儀器與試劑
1. 實驗藥材 槐米20g。
2. 儀器:磁力加熱攪拌器、旋轉蒸發儀、粉碎機、500ml燒杯,1000ml燒杯,50ml燒杯,250ml園底燒瓶、500ml園底燒瓶、100ml量筒、50ml量筒、100ml錐形瓶、50ml錐形瓶、研缽、移液管、減壓過濾裝置,布氏漏鬥,抽濾瓶、層析缸等。
3. 試劑:硼砂、氧化鈣、 HCI、三氯化鋁、甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、甲酸、濾紙、PH試紙等。
(五)實驗步驟
1.提取(水提取法)
稱取槐米粗粉20g,在研缽中研碎後放入500ml燒瓶中,加水200ml,用磁力加熱攪拌器加熱煮沸30min,趁熱過濾。殘渣同法操作壹次,合並兩次濾液,放置冰箱中析晶,待全部析出後,減壓抽濾,用少量蒸餾水洗滌蘆丁結晶,抽幹,得粗制蘆丁,幹燥,稱重,計算得率。