將抗原和抗體分別加入瓊脂凝膠板上相鄰的孔中，並讓它們彼此擴散。當兩者以最合適的比例相遇時，就形成了清晰的沈澱線。根據沈澱線的存在與否，可以用已知抗體鑒定未知抗原，或者用已知抗原鑒定未知抗體。
該方法臨床上常用於檢測原發性肝癌患者血清中的AFP，作為原發性肝癌的早期輔助診斷。