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- 酵母雙雜交文庫的篩選
酵母雙雜交文庫的篩選
將待測基因與Gal4或LexA的DNA結合結構域或其他合適的蛋白融合,構建誘餌質粒;將誘餌質粒轉化到缺乏報道基因啟動子的酵母細胞株中,並選擇轉化的酵母;然後將文庫質粒轉化到酵母中。
通過報告基因的功能篩選相互作用的蛋白質。從酵母中分離質粒,然後轉化到大腸桿菌中。從大腸桿菌中提取質粒並測序。在數據庫中比較測定的序列與已知蛋白質的同源性。
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