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是什麽讓瓊脂糖凝膠中的dna發出熒光?

瓊脂糖凝膠電泳中的Dna被熒光染料溴化乙錠發出熒光。

溴化乙錠是壹種高度敏感的熒光染色劑,用於觀察瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠中的DNA。溴化乙錠被標準的302nm紫外光透射儀激發,發出橙紅色信號,可被寶麗來底片或凝膠成像處理系統用CCD成像頭拍攝。

溴化乙錠含有壹個三環平面基團,可以嵌入DNA的堆積堿基之間,與DNA的結合幾乎沒有堿基序列特異性。

擴展數據

在凝膠中觀察DNA最簡單最常用的方法是用熒光染料溴化乙錠染色。溴化乙錠是壹種分子扁平的核酸染料。在高離子強度下,每2.5個堿基插入壹個溴化乙錠分子。

在DNA的溴化乙錠復合物中,DNA吸收254nm的紫外輻射並將其傳遞給染料,而結合的染料分子本身吸收302nm和399nm的光輻射,因此吸收的能量可以在可見光譜的紅-橙區重新發射590nm。

因此,將核酸分子染色後,在紫外光下觀察電泳樣品,可以非常靈敏、方便地檢測出凝膠介質中的DNA條帶,即使每條DNA條帶只含有0.05g的微量DNA,也能清晰地顯示出來。在適當的染色條件下,熒光強度與DNA片段的大小或數量成正比。

在含有幾個DNA片段的電泳條帶中,每個條帶的熒光強度從最大的DNA片段到最小的DNA片段逐漸降低。

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