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瓊脂糖凝膠電泳的原理是什麽?

瓊脂糖凝膠電泳(瓊脂糖凝膠電泳)是壹種分析不同大小DNA的介質。還是?RNA?電泳分離法。瓊脂糖是壹種多糖,親水但不帶電。

制造?DNA?使其在堿性條件下帶負電(pH8.0?緩沖液),在電流的作用下,以瓊脂糖凝膠為介質,從負極向正極移動,根據不同?DNA?分子碎片的大小和形狀不同,在電場中的遊動速度也不同。同時在樣本中加入染料可以和DNA相似?分子之間形成復合物,經過紫外線照射,可以看到?DNA?位置,從而達到分離和識別的目的。

瓊脂糖凝膠電泳中的註意事項

底板壹定要用膠帶封好,不然倒膠的時候凝膠會漏出來。可以在灌膠前在交接處倒少量凝膠,用凝固的凝膠密封嚴密。

梳子切不可插入底部,離底部1-2mm,否則梳子拔出時容易破膠,造成漏膠。加熱時,應註意不要讓瓊脂糖沸騰得太厲害,只需稍微加熱至溶液冷卻,即會完全溶解。過度煮沸會導致凝膠實際濃度的增加。

凝膠放入電泳槽時註意極性,不要正負極接反。應註意撕掉兩端的密封帶。凝膠的濃度與要分離的DNA的大小有關。壹般濃度是1%,低濃度的膠水特別易碎,要註意。