有酵母雙雜交實驗全套操作步驟的資料嗎？

最近在做龍須菜高溫脅迫表達cDNA文庫的構建。選擇CaM作為誘餌質粒構建表達載體pGBKT-CaM，通過SMART技術將重組質粒轉化酵母Y187。收集了壹些數據，找到了壹套比較完整的酵母雙雜交實驗操作流程。

1.酵母雙雜交系統的原理

酵母轉錄激活因子GAL4由兩個可以分離且功能獨立的結構域組成。N端有壹個DNA結合域(BD)，C端有壹個轉錄激活域(AD)，由113個氨基酸組成。BD可以與上遊激活序列(UAS)結合，而AD可以激活UAS下遊的基因進行轉錄。但BD或AD單獨使用並不能激活基因轉錄，只有將它們以某種方式結合起來，才能具有完整轉錄激活因子的功能。酵母雙雜交系統主要利用酵母GAL4的這壹特性，通過酵母細胞中兩個雜交蛋白的相互作用和報告基因的轉錄激活來研究活細胞中蛋白質的相互作用，蛋白質之間微弱的瞬時相互作用也可以被報告基因靈敏地檢測到。酵母雙雜交技術不僅用於研究哺乳動物與蛋白質的相互作用，也可用於研究高等植物與蛋白質的相互作用。