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什麽是熒光pcr?

熒光pcr是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR過程,最後通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。也稱為實時熒光定量PCR技術。

熒光PCR技術的原理;

將熒光素標記的Taqman探針與模板DNA混合後,完成高溫變性、低溫復性、適當溫度延伸的熱循環,與模板DNA互補的Taqman探針被切斷,熒光素在反應體系中解離。

在特定光的激發下發射熒光,擴增的目的基因片段隨著循環次數的增加呈指數增加。Ct值可以通過實時檢測相應的隨擴增而變化的熒光信號強度來獲得,待測樣品中靶基因的拷貝數可以通過使用幾個已知模板濃度的標準作為對照來獲得。