1,試驗材料和方法
1.1測試材料
1.1.65438+
1.1.2檢測試劑:豬瘟抗體檢測ELISA試劑盒和藍耳病抗體檢測ELISA試劑盒(均為美國IDEXX公司產品)。
主要測試儀器1.1.3微量取樣器;Elx800酶標儀。
1.1.4實驗疫苗豬瘟弱毒疫苗(傳代細胞源);豬藍耳病高致病性弱毒疫苗(JXA1-R株)
1.2測試方法
藍耳病和豬瘟疫苗采用普免法免疫:3個月1次,壹年4次。6月65438+10月、4月、7月、6月65438+10月第壹周免疫2劑豬瘟弱毒疫苗,2月、5月、8月、6月165438+10月第壹周免疫2劑豬藍耳病弱毒疫苗JXA1-R株。仔豬2周齡免疫1藍耳弱毒疫苗,4周齡和9周齡分別免疫1和2聯豬瘟疫苗。本試驗於20112年6月、4月、7月、6月的第25天對豬場的30頭公豬進行了藍耳病和豬瘟抗體水平檢測。2013年,該豬場多胎母豬流產率達8%,死胎率達12%,哺乳豬消瘦咳嗽,死亡率達15%。
1.3 ELISA檢測方法及判定標準
ELISA的檢測方法和判定標準按照IDEXX的試劑盒說明和標準執行。建立豬瘟抗體ELISA檢測方法的條件是:陰性對照的平均OD450值>;0.5,陽性對照阻斷率> 50%。判斷標準:阻斷率;50%是正值。藍耳抗體檢測(IDEXX)ELISA的s/p比為S/P
1.4統計處理
實驗數據用SPSS13.0軟件進行統計分析,統計結果用“均數±標準差”表示,多重比較采用方差分析和LSD法。
2個結果
2.1從圖1可以看出,0.4 ≤ S/P ≤ 2.5是藍耳減毒疫苗感染產生的抗體;標準普爾& gt2.5是野生藍耳病毒感染產生的抗體。公豬藍耳抗體陽性率達到94%,野病毒感染比例達到63%。經產母豬藍耳抗體陽性率達95%,野病毒感染比例達61%。7周齡和12周齡仔豬藍耳抗體陽性率達到99%,野病毒感染比例達到70%。從圖2可以看出,豬藍耳病抗體在公豬中的離散度為52%,平均抗體值為2.82;經產母豬藍耳抗體離散度為47%,平均抗體為2.85。7周齡和12周齡仔豬藍耳抗體離散度為43%,平均抗體為2.99。結果表明,所有豬均明顯感染了野生藍耳病病毒,弱毒藍耳病疫苗不能保護豬場免受藍耳病的侵害。
2.2從圖3可以看出,豬瘟抗體阻斷率>:50%為正值。豬瘟抗體陽性率達到44%;經產母豬豬瘟抗體陽性率達52.7%;7周齡和12周齡仔豬豬瘟抗體陽性率達到57.5%。從圖4可以看出,豬瘟抗體的離散度為37%,平均抗體為53.2%。經產母豬豬瘟抗體離散度為37%,平均抗體為565438±0.8%。7周齡和12周齡仔豬的抗體離散度為42.5%,平均抗體為55.2%。結果表明,整個豬場豬瘟抗體水平較低,分散不理想,整個豬群豬瘟保護率不高。
3.討論
豬藍耳病弱毒疫苗對豬瘟免疫抗體的影響通過對本試驗結果的分析,發現高致病性豬藍耳病弱毒疫苗(株JX-A1-R)免疫後,野生藍耳病病毒的感染率高達64%,藍耳病抗體的平均S/P值超過2.5,說明該豬場的藍耳病病毒是活躍的,已經感染了野生藍耳病病毒,說明該疫苗不可能豬瘟抗體平均陽性率僅為77%,抗體平均離散度僅為39%,均較差,說明豬瘟抗體不合格。由此可知,豬藍耳病高致病性弱毒疫苗(株JX-A1-R)的免疫對豬瘟細胞疫苗的免疫有明顯的幹擾或抑制作用。這與張風華報道的豬藍耳病免疫弱毒疫苗對豬瘟免疫效果有明顯幹擾基本壹致。這很可能與藍耳病病毒的致病機理有關。藍耳病病毒在復制過程中與肺泡巨噬細胞的受體結合,直接導致肺泡巨噬細胞的破碎和溶解,延遲肺泡巨噬細胞對抗原的處理和呈遞,從而導致宿主的免疫調節紊亂。同時,藍耳病病毒作用於免疫系統的T淋巴細胞,導致T淋巴細胞亞群比例下降,從而抑制機體對其他病原體的免疫反應。同時,藍耳病毒還具有“增強抗體依賴性”和抑制豬瘟弱毒疫苗免疫抗體產生的作用,說明豬瘟弱毒疫苗的免疫是壹把雙刃劍,有利也有弊。根據杜的報告,兩種疫苗的免疫間隔為7天,仍有明顯的幹擾。因此,養豬場應根據自身實際情況決定是否免疫藍耳病弱毒疫苗。在2013李曼世界豬大會上,中國工程院院士楊教授明確指出,要少用弱毒藍耳病疫苗,不同毒株的弱毒藍耳病疫苗(藍耳病病毒容易發生變異和重組),要通過提純來控制藍耳病。現在這個觀點已經得到了大多數專家學者和規模化養豬場管理者的認可。