隨著血清細胞培養的發展,培養基的質量是關鍵,而培養基的主要成分動物血清對細胞的生長和繁殖起著重要的甚至是不可替代的作用。動物血清中應用最廣泛的是牛血清,因此血清是醫藥生物技術產品的重要原料之壹。保證血清的質量也是提高生物制品質量的重要環節。血清類型。36860 . 68686868686
目前用於組織培養的血清主要是牛血清,壹些特殊細胞也用人血清、馬血清等進行培養。選擇牛血清進行細胞培養的原因是:來源充足,制備技術成熟,經過長時間的應用試驗,人們對其有了更深入的了解。牛血清適用於大多數哺乳動物細胞,但不排除在培養某些細胞時使用其他動物血清更合適。
牛血清是細胞培養中使用最多的天然培養基,含有豐富的細胞生長所必需的營養物質,具有極其重要的功能。牛血清可分為小牛血清、新生牛血清和胎牛血清。胎牛血清應通過剖腹產從胎牛中取出。新生牛血清取自出生後24小時內的新生牛;小牛血清取自出生於10-30天的小牛。顯然,胎牛血清的質量是最高的,因為胎牛沒有接觸過外界,血清中含有的抗體、補體等對細胞有害的成分是最少的。2.血清的主要成分。
血清是通過從血漿中去除纖維蛋白而形成的復雜混合物。雖然其成分大部分已知,但仍有部分未知,血清的成分和含量往往隨獻血者的性別、年齡、生理狀況和營養狀況而變化。血清中含有各種血漿蛋白、肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等。這些物質在促進細胞生長或抑制生長活性方面具有生理平衡。雖然對血清的組成和功能的研究取得了很大進展,但仍存在壹些問題,主要表現在:壹是血清中可能有上百種成分,但其確切的組成、含量和作用機制尚不清楚,特別是對壹些多肽生長因子、激素和脂質。這給研究工作帶來了許多困難。第二,血清是批量生產的,批次之間差異很大,血清的保存期最多壹年。因此,保證每批血清的相似性極其困難,限制了實驗的規範性和連續性。第三,不排除血清中含有揮發性物質,這被認為是“瓶內變質”的原因之壹。3.血清的主要作用。
提供基礎營養素:氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等。,這是細胞生長所必需的。
提供激素和各種生長因子:胰島素、腎上腺皮質激素(氫化可的松、地塞米松)、類固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長因子,如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。
提供結合蛋白:結合蛋白攜帶重要的低分子量物質,如白蛋白攜帶維生素、脂肪和激素,轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝中起重要作用。
提供接觸促進和拉伸因子,以防止細胞粘附受到機械損傷。
對培養中的細胞有壹定的保護作用:有些細胞,如內皮細胞、骨髓樣細胞等,能釋放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起中和作用。這種效應是偶然發現的,現在有目的地用血清來SeO3消化胰蛋白酶,因為胰蛋白酶已廣泛用於貼壁細胞的消化和傳代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保護細胞免受機械損傷,尤其是在懸浮培養中攪拌時。
硒等。4.細胞培養中使用血清的缺點
血清的成分很復雜。雖然含有許多對細胞有益的成分,但也含有對細胞有害的成分,這使得血清有幾個明顯的缺點:
對於大多數細胞來說,在體內,血清不是它們接觸的生理液體,而是損傷在愈合。