實驗前的思考:人們對酵母的認識和使用歷史悠久。早在史前時代,人們就學會了釀酒。大約6000年前,他們發明了發酵的方法。直到19世紀,人們才得以壹窺醉酵母的真面目。漢斯,與巴斯德同時代的丹麥人,在純培養和分類中研究酵母。為了找到釀造高質量啤酒的方法,他深入研究了酵母。
目的要求
了解酵母的形態結構和芽殖。
酵母的利用。
材料和器具
酵母培養液、顯微鏡、解剖針、載玻片、蓋玻片、吸管、鑷子、稀釋碘、吸水紙(或白紙)、放大鏡、紗布。
方法步驟
酵母的利用
1參考關於酵母利用的相關資料:屬於真菌類,圓形、卵圓形或卵圓形,內含細胞核、液泡和顆粒狀物質,通常以出芽方式繁殖;有的能劈成兩半;有些物種能產生子囊孢子,子囊孢子在自然界中分布廣泛,尤其是在葡萄和其他果蔬中。它們是重要的發酵因子,能分解碳水化合物產生酒精和二氧化碳等。生產中常用的有面包酵母、飼料酵母、酒精酵母和葡萄酒酵母等。有些可以合成醫用纖維素,有些也用於石油發酵。啤酒酵母屬於酵母屬,其細胞為圓形、卵圓形或橢圓形,通過出芽繁殖。它能形成子囊孢子。在發酵工業中,可用於生產酒精或藥用酵母,也可通過對細菌的綜合利用,提取凝結物、麥角固醇、卵磷脂、輔酶a、細胞色素C等產品。
聯系實際,參觀沙灣啤酒廠,取酵母和麥芽,帶回去準備試驗。
第二,觀察酵母
1.取壹滴酵母培養液,制成臨時片劑,用顯微鏡觀察酵母的形狀和顏色。
2.用稀碘染色觀察酵母的細胞壁、細胞核、細胞質和液泡。
3.畫壹個正在發芽的酵母,註意它的芽。
三種酵母的擴大培養
3菌株和培養基
3.1菌株:啤酒酵母
3.2培養基
3.2.1酵母斜面培養基
10麥芽汁固體斜面,pH5.0
3.2.2酵母搖瓶種子培養基
10麥芽汁,pH5.0或葡萄糖10%,玉米漿1%,尿素0.2%,pH 5.0。
3.2.3酵母分批發酵培養基
玉米粉液化糖化後,葡萄糖的當量濃度為10%,玉米糖漿為1%,硫酸銨為0.4%,pH為5.5。
3.2.4酵母補料分批發酵培養基(由學生討論)
4實驗儀器設備
(1)5升發酵罐;
(2)搖瓶器或手搖曲柄;
(3)潔凈工作臺;
(4)離心機
(5)顯微鏡
(6)分光光度計
(7)三角瓶。
五
5.1分批培養
5.1.1壹般流程
斜面培養基的制備、滅菌、接種和培養
所需儀器和物品:滅菌鍋、試管、棉塞、培養基原料、培養箱。
搖瓶中300 ml種子液,三個500ml三角瓶,100ml液體,培養基,培養搖瓶和紗布。
↓
將罐培糖化液(雙酶制糖)稀釋至10%濃度,加入輔料,滅菌,接種。
↓
細胞分離離心機或板框過濾器
5.1.2斜面種子的制備
從保藏斜面上挑取壹圈酵母菌,接種到新鮮斜面試管中,於28℃培養箱中培養24h。
5.1.3搖瓶種子的制備
將上述培養好的斜面種子接種到500毫升滅菌的100毫升搖瓶種子培養基中,在28℃、200轉/分的條件下振蕩培養15-20小時。
5.1.4發酵罐培養
5升發酵罐裝2升發酵培養基,121℃滅菌20min,冷卻至30℃,接入發酵罐(接種量2~3%)發酵。發酵條件為:溫度28℃,
5.1.5
0小時:取樣測定總糖和還原糖;
24小時:每4小時取樣進行鏡檢,並測定細菌濃度;
6實驗時間
三天
7實驗分析項目和方法
(1)酵母鏡檢;
(2)酵母濃度的測定(濕重法):吸取5ml菌液,2500rpm離心5min,除去上清液,稱細菌濕重。
(3)發酵活性的測定
8實驗報告內容和數據處理
9實驗結果和討論
。
補充:5升發酵罐可以用玻璃器皿代替。