葉橫切面顯微鑒定:上下表皮細胞1排,方形至長方形,上表皮細胞明顯較大,約為下表皮細胞的3倍。上下表皮有殘留的非腺毛,下表皮有許多氣孔,具腺鱗和小腺毛。柵欄組織有1排細胞,為葉片厚度的1/2,海綿組織有3-6排細胞。主脈向下突出,上方略隆起。上下表皮內有2-3排厚的角質細胞;維管束1-2,外韌,導管腔內有時可見簇狀針狀橙皮苷晶體。
葉表面觀:下表皮細胞垂壁波狀彎曲,氣孔為直軸。非腺毛有1-11細胞,其中1細胞常縊縮:直徑10-60μm,長30-960μm,疣狀突起明顯。腺毛的頭和柄為單細胞,直徑8-65438±07 μm,長25-40微米;腺鱗頭部有8個細胞,直徑約50μm,柄為單細胞。(1)取1g本品粉末,加入10ml乙醇,水浴加熱15分鐘,過濾。取濾液1ml置於小試管中,加入鎂粉和鹽酸滴,深層液體逐漸變為橙紅色。(檢查類黃酮)
(2)將醇浸液滴在濾紙上,幹燥,在紫外燈下(254nm)觀察,顯示藍色熒光;噴0。5%醋酸鎂甲醇溶液,然後置於紫外光下觀察,熒光變藍。(檢查類黃酮)
(3)薄層層析
①取本品粗粉65438±0g,加乙醇65438±05ml,回流提取30分鐘,過濾。將濾液濃縮至65438±0毫升,作為供試品溶液;另外,將橙皮苷和香風對照品點於同壹張wow膠H-0.5% CMC薄層板上,以苯-乙酸乙酯-醋-酸-乙醇(20: 15: 15: 15)的上清液展開,展開距離為15cm。用1%氧氯化鋯甲醇溶液顯色,在紫外燈(254nm)下觀察。供試品色譜中,在對照品色譜的相應位置上,出現相同顏色的熒光斑點。
②取本品粉末65438±0g,加入甲醇65438±00ml,置水浴中,加熱回流30分鐘,過濾。將濾液加入到處理過的中性氧化鋁柱(100-120目,10g)中,在內徑浴中蒸幹,在殘余池中用30ml水洗脫40ml 40%甲醇,收集洗脫液,在水浴中蒸幹,用30ml水溶解殘余池,用20ml飽和正丁醇溶液萃取兩次,合並。此外,將置於10℃以下的皂角苷乙酯-甲醇-水(15: 10: 20: 10)的下層溶液作為展開劑,將其展開,取出並幹燥。噴10%硫酸乙醇溶液,在110℃烘烤幾分鐘。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同的紫藍色斑點;在紫外光(365nm)下觀察到相同的棕紅色熒光斑點。