組織樣本必須經過研磨、勻漿和超聲處理。
蛋白質溶解性會更好，離心要充分，膜蛋白需要更劇烈的提取，低豐度的膜蛋白可能需要分步提取(超速離心)。還有壹點就是組織中的蛋白酶活性更強，所以要註意抑制蛋白酶活性(添加PMSF和蛋白酶抑制劑雞尾酒)。壹般5%的脫脂奶粉是常用的封閉劑。如果壹抗是多克隆抗體，BSA也是不錯的選擇。