RT-PCR壹般指逆轉錄PCR。
基本操作過程是將提取的RNA進行逆轉錄，然後以獲得的cDNA為模板，設計引物進行擴增，這是檢測基因表達的常用方法。
實時熒光定量PCR也稱為實時PCR。Real-timePCR是通過PCR擴增過程中的熒光信號實時檢測PCR的進程。在PCR擴增的指數期，模板的Ct值與模板的初始拷貝數之間存在線性關系，因此成為定量依據。
PCR原理:
DNA的半保守復制是生物進化和傳代的重要方式。雙鏈DNA可以在多種酶的作用下變性並解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據堿基互補配對的原理復制成同壹個兩分子拷貝。
實驗中發現，DNA在高溫下可以變性熔化，降溫時可以重折疊成雙鏈。因此，DNA的變性和復性可以通過溫度變化來控制，DNA聚合酶和dNTP可以通過添加設計好的引物來完成特定基因的體外復制。
但DNA聚合酶在高溫下會失活，因此每循環都需要添加新的DNA聚合酶，不僅操作繁瑣，而且價格昂貴，制約了PCR技術的應用和發展。