培養條件
1.營養
碳源
蛹蟲草的使用方法
碳源是蛹蟲草合成碳水化合物和氨基酸的基礎，也是重要的能量來源。人工培養時，蛹蟲草可以利用葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、澱粉、果膠等。，其中葡萄糖、蔗糖等小分子利用效果最好。
氮源氮元素是蛹蟲草合成的蛋白質、核酸等有機氮和銨鹽等無機氮。可利用的有機氮有很多，如氨基酸、蛋白腖、豆餅粉、蠶蛹粉等。無機氮主要有氯化銨、硝酸鈉和磷酸氫二銨。有機氮的利用效果最好。
主要礦物元素是磷、鉀、鈣和鎂。壹般添加無機鹽是為了滿足蛹蟲草對礦物質元素的需求。
維生素蟲草菌絲體不能合成必需的維生素，適當添加VB1有利於菌絲體的生長發育。
2.溫度有冬蟲夏草不同生長發育階段的最適溫度、最低溫度和最高溫度的界限。菌絲體的生長溫度為6℃-30℃，低於此溫度很少生長，高於30℃則停止生長甚至死亡。最適生長溫度為65438±08℃-22℃；子實體生長溫度為10℃-25℃，最適生產溫度為20℃-23℃。原基的分化需要較大的溫差刺激，溫差壹般應維持在5℃-10℃。
3.水分和濕度水分是蛹蟲草細胞的重要組成部分。菌絲生長階段，培養基含水量保持在60%-65%，空氣相對濕度保持在60%-70%。子實體生長階段，培養基含水量應達到65%-70%，空氣相對濕度保持在80%-90%。要註意及時補充培養基中的水分和營養液。
4.空氣蛹蟲草需要少量空氣。但子實體發生期需要適當通風，增加新鮮空氣。否則二氧化碳積累過多，女兒座不能正常分化，影響生長發育。
5.光照孢子萌發和菌絲生長階段不需要光照，應保持在黑暗環境中。而轉化到生殖生長階段需要明亮的散射光，照度為100-240 Le (Le是照度的單位)。光照強，菌絲顏色深，品質好，產量高。
6.蛹蟲草的pH值為酸性真菌，其菌絲體生長發育的最適pH為5.2-6.8。但是在滅菌和培養過程中，pH值會降低。因此，配制培養基時，pH值應升至1-1.5，配制培養基時可加入0.1%-0.2%的磷酸二氫鉀或磷酸氫二鉀。經過長期無性繁殖和反復試管轉育的蛹蟲草，其母本基因容易發生變異，出現出草異常，產量和質量下降。因此，在生產中，蛹蟲草菌種應定期進行壹次有性繁殖。具體來說，選擇高產、優質、早熟的蛹蟲草子實體，用0.1%氯化汞溶液或75%酒精進行表面消毒後，用無菌水沖洗表面藥液，懸浮在裝有綜合培養基的容器上方，在21℃-23℃下靜置培養，當培養基表面出現星狀蟲草菌落時，在接種盒中選取單個樣品。蛹蟲草菌絲體鋪滿斜面後提純。獲得的孢子母種必須與出草試驗進行對比，再次選擇優質蟲草子實體進行組織分離，篩選後即可用於擴大栽培品種。
母種擴大培養後，置於水稻培養基上，在18℃-20℃培養20-30天，觀察生長情況。如發現細菌或黴菌汙染，應進壹步提純母種；如果沒有雜菌汙染，可以繼續培養，壹個月後產生橙紅色的子實體，說明母種是可靠的。二級種子培養將液體培養基分裝於500ml三角瓶中，每瓶裝200ml培養基，用12層紗布和壹層牛皮紙密封。母種經過13-30分鐘滅菌後，在無菌條件下接種到帶接種鉤的三角瓶中，每個斜面可接種10瓶以上。接種後在20℃搖床中培養5天左右，形成均勻的小球後即可作為栽培種。
值得註意的是，如果培養液變成混合的，有兩種可能:壹種是應該消除細菌汙染；第二，是菌絲生長過於粘稠造成的。如果難以判斷，可以進行鏡檢。以大米和玉米為主要原料配制培養基，添加10%-25%蠶蛹粉或奶粉，提高蛹蟲草子實體質量。將培養料和營養液按1: 1的比例混合，pH值控制在5.5-7.0。照常裝瓶、滅菌和接種。
菌絲體培養
接種後，瓶子應在幹凈避光的環境中培養，空氣濕度應保護在60%。初期，為減少雜菌汙染，室內溫室應保持在15℃-18℃。當飼料表面覆蓋有蟲草菌絲體時，升溫至20℃-23℃約15d，菌絲體可完全攝食培養物，完成營養生長。