紅茶菌是由紅茶(或用綠茶、烏龍茶、苦丁茶、花茶等)、白糖(或冰糖、蜂蜜)和水釀制而成。其培養方法如下：
（1） 母液的培養：先在開水中加入紅茶、白糖(冰糖)少許，調成稀的紅茶糖水，再略煮滅菌後，即盛入消過毒的玻璃杯中，冷卻至35℃時，再加入壹塊如手指頭大的紅茶菌種，用潔凈紗布封住杯口，三、四天後，杯底生出綠色纖毛，液面長出海蜇皮似的菌膜，再過幾天，茶液變酸，味如楊梅湯，就制成了母液。
（2） 飲液的培養：在消毒過的大口瓶裏，加進煮開的紅茶糖水，冷卻後，把母液加入，過壹個星期左右，即發酵成酸甜茶液，即可飲用。茶液飲完，留下的菌母亦可繼續如上法培養飲液，循環不絕。培養紅茶菌的原料比例是紅茶：糖：水=0.2：5：200。
（3） 菌種的培養：菌種的培養是在培養母液基礎上進行。母液中生成的菌團有多層，下層較嫩而鮮，宜作菌種。良好的菌母會浮在液面，呈乳白色半透明膠質菌團，培養液氣味為酸甜。如果菌團上呈紅綠色即表示已受汙染，培養液不能飲用。
紅茶菌培養註意事項
壹、作好消毒工作。重中之重就是消毒，培養紅茶菌的容器必須要做好消毒。方法1、在開水中煮沸10分鐘；方法2、用消毒水進行消毒。（如培養中發現表面長有其它菌可以用酒精在表面噴灑壹日二次）
二、菌種的選擇。要選擇原生俄羅斯的優良菌種，其品質好，易成活。選擇菌種厚，菌膜面積大的，其菌種菌力強,不易酶變(上面不長白毛)。
大號菌種菌力強，做菌液快，而且質量高。壹次做菌液做的多。采用傳統方法及透氣性高的壇子培養，可保持紅茶菌原有的很多優秀品質。
選用小號菌種壹次只能做壹小杯10天壹個周期（除去蒸發只剩下壹半）。
選用大號優良菌種（直徑17-20厘米的）菌種可以做（直徑17-20厘米的）壹大壇。
如用小號菌種做壹大壇，菌種帶不動會死的。
三、原料的選擇。最好用壹些沒有處理過的天然茶葉，糖最好選用葡萄糖，成活率極高，培養速度快。不要使用蜂蜜，現在的蜂蜜不純，雜質多。
四、糖，茶，水的投放量。糖、茶、水的重要比例是5：0.1—0.4：100（五比零點壹至零點四比壹百）。茶要少放有壹點點著色就可以了，茶多限止菌的生長，茶濃菌會死。糖有壹點甜味就可以，水第壹次做要少放，壹張最大的17厘米的可放二斤水，其它菌種放水3兩，水放多了菌帶不動，第二次有經驗可以加倍。
五、通風。 壹定要做好通風不讓其它雜菌成活，通風是很主要的，因為通風可以有效的減少其它雜菌在培養器具中的濃度使其它菌不能寄生在紅茶菌菌膜上。
六、購菌種時請註意其單位。因為紅茶菌菌種有80%是水，所以不要以重量來選購菌種，因為菌種到家時都是水，看起來多少克好像很多的樣子，其實購的都是水。選些直徑大的，品質好的，厚度好的，來源血統好的，如前俄羅斯高加索出來的壇養的俄羅斯菌種就是非常好的。（選自★我愛紅茶菌網★）第壹次做,放入三斤水,煮茶葉,茶要少放有壹點色就可以,糖放的有甜味就可以了. 糖、茶、水的比例是5:0.1-0.4:100。（五比零點壹至零點四比壹百）