2003年，在餐館打工的被導演詹介紹到壹家廣告公司，正式開始了他的個人演藝生涯。
2004年，李佳穎獲得鐘石綜藝節目《讓我猜猜》美少女評選單元壹等獎。
2005年，李佳穎出演了她的第壹部電影和電視劇。她與林佑威、藍正龍和楊雨欣聯袂主演了青春愛情劇《45度藍天》。同年，李佳穎還出演了都市劇《極限熨衣板》。
2006年，李佳穎與明道、白歆惠和蔣易聯袂主演了都市偶像劇《天使情人》。同年，還與舒、王建民、孫興合作了都市劇《邁克，走！飾演堅強開朗的女主角黃少軒，李佳穎獲得亞洲電視節最佳女主角提名，41臺灣電視金鐘獎最佳女主角提名。
2007年，李佳穎與路嘉欣和張永正合作了他的第壹部電影《穿墻的人》，李佳穎因此獲得了臺北電影節評審團特別推薦的女演員獎。
2008年，李佳穎與林韋君、漢斯·張、蘇明明合作出演現代情感劇《春風陪我》；同年，李佳穎還與文勝豪、楊金華和許安安合作了歷史戰爭電影《1895》。
2009年，李佳穎與汪東城、王心淩和凱文聯合主演了都市愛情劇《小桃花》。同年，李佳穎與李淑楨、吳朋奉、邱祖瑞合作主演家庭倫理劇《愛主之願》；此外，李佳穎還與田明、肖遙和遊誌祥合作了電視劇《失落的玻璃珠》。
2010，李佳穎憑借主演迷妳劇《看見天堂》獲得第45屆臺灣電視金鐘獎最佳女主角提名。同年，李佳穎還與楊佑寧、曾寶儀和郭書瑤合作出演了家庭偶像喜劇《尼婭達》。
2011，與、、馮合作主演美食愛情劇《烹飪戀人夢》，在劇中飾演美麗大方的女主角李安安；隨後，李佳穎與黃騰浩、胡安安和黃湘怡共同出演了都市情感劇《溫情脈脈》。同年，李佳穎還出演了現代戲《流浪竹林》；並主演了浪漫電影《那年我做錯了什麽》。
2012年，李佳穎在藍正龍、周湯豪、白梓軒主演的愛情喜劇《粉愛妳》中，飾演了壹些公主病的女主角夏洛特。同年，李佳穎和張書豪主演了浪漫劇《風箏的祝福》。
2013年，李佳穎與賀思愛、鐘承翰共同出演L城勵誌劇《刺猬少年》，在劇中飾演清純可愛的女主角夏雨靜。
2014年，李佳穎與張書豪、何以航、陳乃榮合作出演現代家庭溫情劇《沒有長大的爸爸》，飾演他的第壹個母親角色潘秀慧。
2015年，李佳穎與唐禹哲、Jolin、王思平共同出演都市愛情偶像劇《墨菲，這就是愛情》，飾演保守卻對愛情充滿期待的愛情醫生關曉彤。