《霸王別姬》的故事主要取材於西漢演義。描述了西楚霸王項羽，有勇無謀，剛愎自用，聽信漢軍韓信派來的之言，不顧百姓和虞姬的勸阻，起兵攻打漢，率軍直入九裏山，中了韓信的誘敵之計。
項羽嘆大勢已去，於吉拔劍大方舞，哀嘆不已。此時漢軍急襲，於吉恐誤行程而自盡。項羽領兵出征迎敵，大敗，也在烏江自殺，楚國最終被漢滅。
《霸王別姬》的戲劇感染力
目前只有《我的妃子》這出戲第八場普遍打九折演出。這種折疊充滿了悲劇氣氛。當於吉代表項羽在夜間巡視軍營時，她聽到了士兵們的抱怨和楚國的歌聲。為了表現於吉從優柔寡斷到確信軍心渙散，從看到大勢已去到下定決心告別項羽，劇中安排了壹大段“南梆子”唱腔，梅蘭芳的唱腔委婉婉轉，把於吉悲涼悲涼的情緒表現得細膩生動。
梅蘭芳還安排了壹組劍舞來表達於吉對項羽的哀思。她在“深夜”的曲調中緩緩舞動著劍，讓於吉笑得滿臉淚水，非常感人。